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不含血清及动物源成分 ,化学组成明确 ,避免外源因子污染(如病毒、支原体)。
含保护性成分 ,如 DMSO ,减少冷冻损伤 ,提高细胞存活率(复苏活率>98%)。
保存说明:
保存 :4℃保存 ,一年有效;运输 :冰袋(2-8℃) 或蓝冰运输。
操作便捷性:
1. 无需程序降温 :可直接将冻存管置于-80℃冰箱冷冻 ,省去传统梯度降温步骤。
2. 即用型配方 :无需额外配制 ,简化实验流程。
3. 保存稳定性。
4. 冻存细胞可在-80℃保存 1-2 年 ,长期保存建议转移至液氮( >5 年)。
5. 冻存液本身在 2-8℃ 保存 12 个月。
操作步骤:
细胞冻存
细胞准备
1、选择对数生长期、状态良好的细胞 ,确保无污染。
2、贴壁细胞 :消化成单细胞悬液(推荐含 EDTA 的胰酶)。
3、悬浮细胞 :直接离心(300g , 5-10 分钟)弃上清。
4、重悬与分装:
1) 用预冷的冻存液重悬细胞 ,调整浓度为 1 × 10⁶ ~1 × 10⁷/mL(推荐密度: 2-5× 10⁶/mL)。
2) 分装至冻存管(每管 1-1.5mL) ,避免室温停留超过 10 分钟。
5、冷冻保存:
1) 直接转移冻存管至-80℃冰箱 ,无需程序降温盒。
2) 长期保存: 24 小时后转入液氮罐(气相液氮更佳)。
细胞复苏:
快速解冻
1、从液氮或-80℃取出冻存管 , 37℃水浴轻摇至仅剩微小冰块。
2、稀释与离心:
1) 将细胞悬液转移至含预温培养基(体积为冻存液 9 倍) 的离心管 ,轻柔混匀。
2)离心(300g , 5 分钟)弃上清 ,去除残留 DMSO。
3、接种培养 :用新鲜培养基重悬细胞 ,接种至培养容器 ,24 小时后更换正常培养基。
注意事项:
1、细胞状态 :冻存前确认细胞无污染且处于增殖旺盛期 ,避免使用衰老或过密细胞 ,*好是 1 天能传代一 次。
2、操作时效性 :冻存液与细胞混合后需迅速分装冷冻 ,避免长时间暴露于室温或 4℃。
3、安全防护 :含 DMSO 成分 ,操作时需穿戴实验服及手套 ,避免直接接触皮肤。
4、保存条件 :冻存液开封后建议分装 ,避免反复冻融;长期存放需严格密封。
5、适用性验证:首次使用特定细胞类型时 ,建议测试冻存效果(如保存时间、复苏活率)。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用 ,不得用于临床诊断或治疗 ,不得用于食品或药品 ,不得存放于普通 住宅内。
7、为了您的安全和健康 ,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
原创作者:上海语纯生物科技有限公司
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