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细胞系/株原代细胞细胞培养液感受态智能冷链箱血液制品细胞培养耗材辅助试剂

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Tuner感受态

产品货号：CC96141

产品规格：10 ×100ul/100×100ul

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标签：感受态

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产品简介

Tuner 系列菌株是 lacZY 删除的 BL21 突变菌株，其中 lacY 的突变使得 IPTG 能够进入所有细胞的胞

内，从而使得蛋白的诱导水平具有 IPTG 的浓度依赖性。当与 pET 系列载体联合使用时，可使蛋白

的表达量从低表达水平到超高表达水平的范围内进行有效的调节；而在蛋白表达水平低的情况下，

目的蛋白可能会呈现更好的可溶性和活性。因此，Tuner系列菌株的蛋白表达水平可以通过IPTG浓

度来进行精确而严谨的调控。此外，Tuner 系列菌株还是 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株。由于该

菌株不含有 λDE3序列，不表达 T7 RNA 聚合酶，因此不能用于 T7启动子系列质粒的蛋白表达。经

pUC18 质粒转化检测，Tuner 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。

产品组成

组分

Tuner

化学感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。

原创作者：上海语纯生物科技有限公司

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