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产品分类：

细胞系/株原代细胞细胞培养液感受态智能冷链箱血液制品细胞培养耗材辅助试剂

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NovaBlue (DE3)感受态

产品货号：CC96125

产品规格：10 ×100ul/100×100ul

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标签：感受态

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产品简介

NovaBlue(DE3)来源于 K12 菌株，具有极高的转化效率，是转化效率最高的原核表达菌株，可同时

用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体 DNA 中整合了噬菌体 λDE3 序

列，使得 NovaBlue(DE3)菌株可用于 pET 系列、pGEX、pMAL 等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3)

菌株具有四环素抗性，endA1 和 recA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取；

lacZΔM15 突变使得 NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑实验筛选。经 pUC18 质粒转化检测，NovaBlue

(DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA 以上。

产品组成

组分

NovaBlue(DE3)

感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- [proA+B+ lacI q ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12- mk12+) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac (DE3)

存储条件

-80 ℃保存，请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。

原创作者：上海语纯生物科技有限公司

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