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细胞系/株原代细胞细胞培养液感受态智能冷链箱血液制品细胞培养耗材辅助试剂

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BL21(DE3)/pLysS)感受态

产品货号：CC96164

产品规格：10 ×100ul/100×100ul

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标签：感受态

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产品简介

BL21(DE3)/pLysS 菌株携带 pLysS 质粒，具有氯霉素抗性。pLysS 含有表达 T7 溶菌酶的基因，T7 溶菌酶

可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰

IPTG 诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。该菌株染色体整合了 λ(DE3)序列，可表达 T7 RNA

聚合酶，适合于 T7 启动子系列质粒的蛋白表达。该感受态细胞经 pUC18 质粒检测，其转化效率高达 108

cfu/μg DNA。

产品组成

组分

BL21(DE3)/pLysS

化学感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdS (rB-mB-) gal dcm (DE3) pLysS CamR

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

产品特性

-该菌株为 recA+基因型，故不用于质粒的保存；

-属于大肠杆菌 B 株系列，可用于以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的蛋白表达；

-pLysS 含有表达 T7 溶菌酶的基因，T7 溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，能够

降低目的基因的背景表达水平，但不干扰 IPTG 诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

质量控制

除 pLysS 外，无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。

原创作者：上海语纯生物科技有限公司

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