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细胞系/株原代细胞细胞培养液感受态智能冷链箱血液制品细胞培养耗材辅助试剂

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DH10B plus电转克隆感受态

产品货号：EC96193

产品规格：10 ×50ul/100×50ul

产品价格： ￥电议

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标签：感受态

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DH10B-Plus 感受态细胞用电击法转化的效率较高，故不推荐使用热激法化学转化。DH10B-Plus 菌

株来源于 DH10B 菌株，在 DH10B 菌株中引入 Hte 突变，提高了细胞膜的通透性和对瞬时高压的耐

受进而提高了电击转化效率。DH10B-Plus 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA

(无论真核生物还是原核生物的基因组 DNA 都能被高效的转入 DH10B-Plus 中)。recA1 和 endA1 的

突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取， lacZΔM15 标记的存在使 DH10B-Plus 可

用于蓝白斑筛选。DH10B-Plus 电击感受态细胞具有链霉素和四环素抗性，适用于大质粒的构建或

各种文库构建，经特殊工艺处理，pUC18 质粒检测转化效率可达 1010 cfu/μg DNA。

产品组成

组分

DH10B-plus 感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697

galE15 galK λ- rpsL nupG Hte (TetR)

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥1010 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，转入冰上预冷的电击转化杯中；

3. 使用电转仪进行电击转化（转化参数为：2mm 电击杯，2.5kv，200Ω，电转化时间一般为 4-5 ms

左右）；

4. 电击后迅速取出电击杯，向其中加入 900 μL 液体 LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后

置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰上解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 不应含有较高的离子强度，建议总体积不超过 5 μl，一般为 1-2 μl；

3. 为确保最高转化效率，电转化杯一定要在冰上预冷；

4. 如使用 1 mm 电击杯，则转化参数改为 1.25 kv 和 200 Ω。

原创作者：上海语纯生物科技有限公司

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