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细胞系/株原代细胞细胞培养液感受态智能冷链箱血液制品细胞培养耗材辅助试剂

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Stbl2感受态

产品货号：CC96133

产品规格：10 ×100ul/100×100ul

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标签：感受态

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产品简介

Stbl2 菌株来源于大肠杆菌 JM109 菌株，适合于克隆含不稳定序列（如正向重复序列、反向重复序

列、逆转录病毒的序列等）。另外，mcrA基因的突变和 mcrBC-hsdRMS-mrr基因缺失使得该菌株更

适于克隆甲基化的基因组序列；同时 Stbl2 也可用于慢病毒载体的构建。该菌株中 recA1 和 endA1

的突变有利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。Stbl2 感受态细胞的平板生长最优条件

是 30 ℃。Stbl2 感受态细胞中包含有 α 互补序列的质粒，所以本宿主菌株不能被用于蓝白斑筛选实

验；本菌株也不耐受 ccdB 毒性。经 pUC18 转化检测，Stbl2 感受态细胞的效率可达 107 cfu/μg DNA。

产品组成

组分

Stbl2 化学感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：FendA1 glnV44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 Δ(lac-proAB) mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) λ-

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

产品特性

-属于大肠杆菌 K 株系列，主要用于目标基因的克隆和质粒的保存；不可用于以 T7 RNA 聚合酶为

表达系统的蛋白表达；

-该菌株适合克隆不稳定插入片段，甲基化的基因组序列，以及慢病毒载体的构建。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基（室温或37 ℃预热），然后置于37 ℃摇床复壮45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。

原创作者：上海语纯生物科技有限公司

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