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产品分类：

细胞系/株原代细胞细胞培养液感受态智能冷链箱血液制品细胞培养耗材辅助试剂

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JM330感受态

产品货号：CC96103

产品规格：10 ×100ul/100×100ul

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标签：感受态

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产品简介

JM330 菌株(即 DH5α T1 Phage Resistant)，来源于 DH5α 菌株；通过在 DH5α 大肠杆菌基因组中引入

了 tonA 突变获得，因而具有抵抗噬菌体 T1 和 T5 的能力。JM330 菌株最大的特点是其可以在体内

特异性降解甲基化的质粒模板，被广泛应用于 DNA 定点突变实验（即反应产物在转化之前无需再

进行 DpnI 酶切处理）。JM330 菌株缺失核酸内切酶 (endA1)和重组酶(recA1)，提高了质粒 DNA 的

产量和质量； lacZΔM15 的存在使 JM330 可用于蓝、白斑筛选实验。经 pUC18 质粒转化检测，

JM330 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA 以上。

产品组成

组分

JM330 感受态细胞

10 × 100μL

100 × 100μL

定制

基因型：F- φ80 lacZ∆M15 ∆(lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17 (rK- mK+) phoA supE44 λ- thi-1 gyrA96 relA1 tonA

存储条件

-80 ℃保存，请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基（室温或37 ℃预热），然后置于37 ℃摇床复壮45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。

原创作者：上海语纯生物科技有限公司

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