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产品分类：

细胞系/株原代细胞细胞培养液感受态智能冷链箱血液制品细胞培养耗材辅助试剂

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DH5α 感受态

产品货号：CC96102

产品规格：10 ×100ul/100×100ul

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标签：感受态

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产品简介

本品为使用大肠杆菌 DH5α 菌株制备的高效化学感受态细胞，转化效率可达 108 cfu/μg DNA，被广

泛用于质粒转化、基因克隆等；可以使用蓝白斑筛选。

产品组成

组分

DH5α 感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型： F- φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17(rk- , mk+) phoA supE44 thi-1 gyrA96

relA1 λ-

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

产品特性

-该菌株的重组率较低，故常用于克隆质粒的保存；

-蓝白斑筛选时，需在平板上预先涂布 IPTG 和 X-gal；

-属于 E. coli K12 系列，可用于基因克隆等；不可用于以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的蛋白表达。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基（室温或37 ℃预热），然后置于37 ℃摇床复壮45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。

原创作者：上海语纯生物科技有限公司

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