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产品分类：

细胞系/株原代细胞细胞培养液感受态智能冷链箱血液制品细胞培养耗材辅助试剂

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DH10Bac 感受态

产品货号：CC96136

产品规格：10 ×100ul/100×100ul

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标签：感受态

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产品简介

DH10Bac 菌株主要用于生产重组杆状病毒分子（Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统）。该菌株中含有父

本 bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124；其中， bMON14272 中包含 mini-F 复制子, 卡那抗

性基因, attTn7 位点和 lacZα 互补因子；而辅助质粒 pMON7124 含有 tnsABCD 区，可表达转座蛋白

来帮助把供体质粒上的 mini-Tn7 插入到父本的 bacmid 上的靶标位点。当 DH10Bac 感受态细胞转化

了在多克隆位点克隆了外源片段的供体质粒(如 pFastBac)时，该菌株可生成复合 bacmid。DH10Bac

菌株携带 ϕ80lacZΔM15 突变，因此可用于蓝白斑筛选实验。经 pUC18 质粒转化检测，DH10Bac 感

受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。

产品组成

组分

DH10Bac

化学感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL

nupG /pMON14272 / pMON7124

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化DNA加入到100 μL感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30 min；

3. 将离心管置于42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激90s后，立刻置于冰浴中静置2-3 min；

4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基（室温或37 ℃预热），后置于37 ℃摇床复壮45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10；

3. 加入待转化DNA后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。

原创作者：上海语纯生物科技有限公司

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