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热线电话:021-52273538发布时间:2023/2/28 15:00:49点击次数:292
语纯生物无外泌体胎牛血清与Gibco无外泌体胎牛血清对比报告
一.实验材料
无外泌体胎牛血清(语纯生物),无外泌体胎牛血清(GibcoA27208-03),BMSC(CTCC),DMEM高糖培养基(HycloneSH30243.01B),100X青霉素-链霉素溶液(上海生工E607011-0100),0.25%胰酶(碧云天C0201),0.22μm滤膜(Millex),外泌体提取试剂盒(贝博BB-3901-1)
二.实验仪器
细胞培养箱(ThermoScientific8000),光学显微镜(上海精密仪器仪表有限公司XDS-1A),倒置显微镜(OLYMPUS,IX71),超净工作台(上海沪净医疗器械有限公司SW-CJ-2D),电热恒温水浴槽(贺德DK-08D),超高速离心机(BeckmanOptinal-90K)
三.无外泌体胎牛血清制备方法
1.制备工艺和参数略;
2.用0.1μm的滤膜过滤上清液,即得无外泌体胎牛血清。
四.外泌体制备及鉴定
1.BMSC细胞在正常含FBS的培养基中培养一定的时间后,细胞融合度约为60%-70%时,移去原有含血清的培养基,分别换成语纯生物无外泌体胎牛血清和Gibco无外泌体胎牛血清;
2.继续培养48h左右,细胞融合度达到80%-95%左右时收取上清液;
3.用外泌体提取试剂盒进行外泌体提取;
4.通过电镜和WesternBlot技术进行外泌体鉴定,结果显示语纯生物无外泌体胎牛血清和Gibco无外泌体胎牛血清制备外泌体的效果基本一致。
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